La elución es una técnica mediante la cual el anticuerpo deseado se libera de los complejos antígeno-anticuerpo y se recupera para la identificación. Esta técnica se utiliza cuando la prueba de Direct Coombs muestra inesperadamente falsos negativos, especialmente en recién nacidos con eritroblastosis ABO. En algunos casos de Rh (D) incompatibilidad, el suero de la madre con un título muy alto de anticuerpo anti-D, la sangre del cordón umbilical recién nacido da una DCT positiva muy fuerte, pero ocasionalmente encontró el Rh como negativo D. Esta situación puede deberse al bloqueo anti-D materno o al enmascaramiento de los sitios antigénicos D en las células del lactante o en un anticuerpo materno no reconocido, como las células del cordón Kell positivas para el recubrimiento anti-K negativo. El verdadero fenotipo de las células del cordón puede determinarse fácilmente al encontrar la especificidad del anticuerpo eluido de las células, por ejemplo, si es anti-D se eluye, D +, si se eluye anti-K, Kell +. Este paso es esencial cuando el suero de la madre no está disponible. Un caso de eritroblastosis fetal ABO vino a mí mientras trabajaba en UTH, LUSAKA, la sangre del cordón umbilical s mecanografiado como A positivo y DCT negativo mientras que el suero dio un color casi rojo que muestra hemólisis intensa (HDN). La muestra de la madre se tipificó como O positiva con un título alto de anticuerpos anti-A (IgG) y un título anti-B moderado. Allí la elución técnica trabajada. La sangre del cordón libre de la jalea de Wharton se lava a fondo para obtener rbcs empaquetados. A las células empaquetadas en un tubo de vidrio se agrega albúmina bovina al 5% (1: 2), se mezcla y se agita continuamente durante 5 mts a 56 ° C. Una vez finalizado, el tubo se transfiere a una centrífuga precalentada (56C) y se centrifuga a 2500 rpm durante 2 m. Luego se separa el sobrenadante, que contiene el posible anticuerpo, inmediatamente en otro tubo. La prueba se realiza con células A y A1 conocidas y el eluyente La proporción de eluyente y rbcs es importante. La mezcla se incuba a 37 ° C durante 20-30 mts y se lava a fondo para eliminar la solución no deseada. La DCT se realiza con control positivo y negativo conocido. Si el eluyente contiene anti-A y / o A1 debe dar un resultado positivo con el suero de Coomb. La razón de la falso resultado DCT negativo en rbcs sin elución, no es explicativo.
¿Qué sabes sobre la técnica de elución en inmunohematología?
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